Question

【題目】下表為幾種限制性核酸內切酶識別的序列和切割的位點。如圖，已知某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位點。現用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割該DNA片段（假設所用的酶均可將識別位點完全切開），下列各種情況中，可以防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環狀的是

A.1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ

B.1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ

C.1為PstⅠ，2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ，4為BamHⅠ

D.1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ

Answer 1

【答案】A

【解析】

由于限制酶具有特異性，一種限制酶只能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并形成特定的黏性末端．題干中提出“為防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環狀”，即要求目的基因兩側的黏性末端不同，因此一般選擇不同的限制酶進行切割。

A、如果1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ，則用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割該DNA片段，將會在2處和3處將目的基因切割，并且形成了不同的黏性末端，可以防止目的基因的自身環化，A正確；
B、如果1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ，則用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割該DNA片段，將會在2處和3處將目的基因切割，并且2處和3處形成了相同的黏性末端，不符合題意，B錯誤；
C、C項中2處和3處均被EcoRⅠ酶切割，因此2處和3處形成了相同的黏性末端，不符合題意，C錯誤；
D、如果1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ，則用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時切割該DNA片段，將會在2處和4處將目的基因切割，并且黏性末端相同，不符合題意，D錯誤。
故選A。