Question

【題目】（一）某農業生態園利用自產的蔬果加工食品。請回答：

（1）將種植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分別是__________，在制作葡萄酒時，發酵液裝量不能超過發酵瓶容量的__________。制作果醋時，可以利用__________技術，將微生物吸附在鋸末上進行生產。

（2）將種植的黃瓜等新鮮蔬菜腌制泡菜時，微生物利用新鮮蔬菜中的營養物質進行發酵，會產生_____和亞硝酸。泡菜中的亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生__________反應，產物與 N-1-萘基乙二胺偶聯，形成紫紅色的產物，根據這一特性可利用__________法定量。

（3）在果酒、果醋和泡菜的生產過程中沒有進行嚴格滅菌也能制作成功，原因是__________。

（二）重組人抗凝血酶Ⅲ（ATryn）可用于預防和控制遺傳性抗凝血酶缺乏癥患者在手術中或分娩時可能出現的凝血狀況，如圖為利用轉基因山羊生產ATrynn的部分技術路線。請回答：

（1）獲得已知序列的ATryn基因可采用__________方法。山羊的ES細胞（胚胎干細胞）能分化出成體動物的所有組織和器官，這體現了ES細胞具有__________性。

（2）一個ES細胞變成ES細胞群的過程中，可出現__________現象，從而使細胞分布為單層。山羊的ES細胞不能發育成完整個體，因此要通過__________技術形成重組細胞，經過__________、胚胎培養、__________，最終由代孕母羊產下克隆山羊。從轉基因山羊的乳汁中提取ATryn藥物。

（3）下列關于動物細胞培養和核移植的敘述，正確的是____________________。

A.從原代培養物或細胞系中選擇和純化無法獲得細胞株

B.動物細胞培養基中添加胰島素的目的是調節血糖濃度

C.胚胎干細胞培養過程中的飼養層可促進胚胎干細胞分化

D.核移植形成的重組細胞在初次分裂時核基因不轉錄

Answer 1

【答案】酵母菌和醋酸桿菌 2/3固定化有機酸和醇類物質重氮化光電比色菌種在短時間內大量繁殖，產生大量代謝產物，可抑制雜菌生長化學合成（或PCR擴增）發育全能接觸抑制核移植胚激活胚胎移植D

【解析】

1.制作葡萄酒主要利用酵母菌發酵，溫度控制在18～25℃，制作葡萄醋主要利用醋酸菌的發酵，溫度控制在30～35℃，制作泡菜主要利用乳酸菌，溫度控制在28～30℃；2.固定化微生物技術是用化學或物理手段將游離微生物定位于限定的空間區域,以提高微生物細胞的濃度,使其保持較高的生物活性并反復利用的方法。3.分析題圖內容：過程①②屬于基因工程，過程③屬于動物細胞培養，過程④屬于核移植。

（一.(1）將種植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分別是酵母菌和醋酸桿菌；在制作葡萄酒時，發酵液裝量不能超過發酵瓶容量的2/3，防止發酵過程產生的二氧化碳氣體釋放而引起的發酵基質的膨脹。制作果醋時，可以利用固定化技術，將微生物吸附在鋸末上進行生產。

（2）腌制泡菜時，在無氧的條件下，微生物利用新鮮蔬菜中的糖和其他營養物進行發酵，產物有有機酸、醇類物質和亞硝酸等。亞硝酸鹽可與對氨基苯磺酸發生重氮化反應，這一產物再與N-1-萘基乙二胺偶聯，形成紫紅色產物，可用光電比色法定量。

（3）在果酒、果醋和泡菜的生產過程中沒有進行嚴格滅菌也能制作成功，原因是菌種在短時間內大量繁殖，產生大量代謝產物，如酒精、醋酸等可抑制雜菌生長。

二．（1）擴增已知序列的ATryn基因可用PCR技術；胚胎干細胞在功能上具有發育的全能性，利用此特性可將山羊的ES細胞（胚胎干細胞）分化出成體動物的所有組織和器官。

（2）ES細胞是正常體細胞，其分裂形成細胞群的過程中，若不發生基因突變，則會出現接觸抑制現象；動物體細胞的細胞核具有全能性，可將ES細胞的細胞核與卵細胞的細胞質通過核移植技術形成重組細胞，經過胚激活、胚胎培養、胚胎移植，最終由代孕母羊產下克隆山羊。從轉基因山羊的乳汁中提取ATryn藥物。

（3）從一個經過生物學鑒定的細胞系或原代培養物用單細胞分離培養或通過篩選的方法，克隆具有特殊性質或標志的單細胞獲得的細胞群，呈細胞株，A錯誤；胰島素的作用是降低血糖，而動物細胞培養不需要調節血糖濃度，B錯誤；胚胎干細胞培養時，加飼養層是為了抑制胚胎干細胞分化，C錯誤；核移植形成的重組細胞分裂的準備在重組前已完成，在初次分裂時核基因不轉錄，D正確．答案選D。