Question

【題目】國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過(guò)個(gè)，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來(lái)測(cè)定，流程為：用濾膜過(guò)濾1ml待測(cè)牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。

（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時(shí)提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。

（2）為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對(duì)于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_____________。

（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計(jì)：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如下：

培養(yǎng)時(shí)間	12h				24h
平板	對(duì)照組	1	2	3	對(duì)照組	1	2	3
大腸桿菌菌落數(shù)（個(gè)）	0	132	121	145	0	132	121	145
其他細(xì)菌菌落數(shù)（個(gè)）	112	253	222	244	112	253	222	244

（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。

（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請(qǐng)說(shuō)明理由：_____________。

Answer 1

【答案】蛋白胨 鑒別培養(yǎng)基 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d 黑色 培養(yǎng)24h的菌落較大（或培養(yǎng)12h的菌落較小） 對(duì)照組有其他細(xì)菌菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基制作不合格或無(wú)菌操作存在問(wèn)題，需重做實(shí)驗(yàn)

【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，蛋白胨可以提供碳源、氮源和維生素。添加了伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌可以和伊紅美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)形成黑色菌落，從而鑒別大腸桿菌。整個(gè)微生物培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中需要防止其它雜菌的干擾，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)。

（1）蛋白胨可以同時(shí)提供碳源和氮源，乳糖只能提供碳源，氯化鈉只能提供無(wú)機(jī)鹽；按功能分，EMB培養(yǎng)基可以通過(guò)伊紅美藍(lán)鑒別大腸桿菌的有無(wú)，屬于鑒別培養(yǎng)基；

（2）為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，一般常常使用將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d，觀察是否有菌落產(chǎn)生；

（3）伊紅美藍(lán)和大腸桿菌反應(yīng)產(chǎn)生黑色；

（4）培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)菌的繁殖數(shù)量就越多，因此培養(yǎng)24h的菌落較大；

（5）分析表格數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組有其他細(xì)菌菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基制作不合格或無(wú)菌操作存在問(wèn)題，需重做實(shí)驗(yàn)。