Question

【題目】尿素是一種重要的農業肥料，經微生物分解后能更好的被植物利用．某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計實驗并成功篩選到能高效分解尿素的細菌（目的菌）．培養基成分如下表所示．

KH2PO4	NaHPO4	MgSO47H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	lg	15g

將表中物質溶解后，用蒸餾水定容到100mL．實驗過程如圖所示：

回答下列問題：

（1）該培養基能篩選出目的菌的原因是______．

（2）圖中將細菌轉到固體培養基上接種時，可采用的方法是______．初步篩選出來的菌種還需要進一步的鑒定：在培養基中加入______指示劑，接種并培養初步篩選的菌種，若指示劑變成______色，則可說明該菌種能夠分解尿素．

（3）在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是______，需要消毒的是______（填序號）．

①培養細菌的培養基與培養皿

②玻棒、試管、錐形瓶和吸管

③實驗操作者的雙手

（4）在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養基上篩選出大約50個菌落，而其他同學只選擇出大約20個菌落．A同學的實驗結果產生的原因可能有______（填序號）．

①所取土樣不同②培養基被污染③接種操作錯誤④沒有設置對照實驗

（5）實驗結束后，使用過的培養基應該進行______處理后，才能倒掉．

Answer 1

【答案】該選擇培養基中的唯一氮源是尿素 稀釋涂布平板法 酚紅 紅 ①② ③ ①②③ 滅菌

【解析】

1、選擇培養基是在培養基中加入相應的特殊營養物質或化學物質，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。
2、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。
3、消毒和滅菌：

（1）該培養基中不加其它氮素，只以尿素作為唯一氮源，在此培養基上只有能夠產生脲酶將尿素分解的細菌（目的菌）才能獲得氮源，而不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖，故能從眾多微生物中選出能分解尿素的目的菌。

（2）為進一步分離和純化目的菌，還需進行稀釋涂布平板法轉入固體培養基，以便于獲得單個菌落繼續培養。分解尿素的細菌能合成脲酶，脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，因此在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

（3）微生物培養實驗中，需要對培養細菌用的培養基與培養皿，玻棒、試管、錐形瓶和吸管進行滅菌處理；對實驗操作者的雙手進行消毒。故需要滅菌的是①②，需要消毒的是③。

（4）該同學與其他同學獲得的菌落數差異很大，原因分析如下：土樣不同可能導致計數偏差；培養基污染會導致菌落數增加；操作失誤可能增加微生物的數量和種類，菌落會增多；而沒有設置對照不會增加菌落數目，故選①②③。

（5）實驗結束后，使用過的培養基進行滅菌處理后，才能倒掉，避免污染環境。