Question

【題目】科學家采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因綿羊，以通過乳腺生物反應器生產人—抗胰蛋白酶，其技術路線如圖：

回答下列問題：

（1）基因表達載體應當包括______，構建基因表達載體常用的酶是______，常用載體有________。

（2）核移植的受體應選用______期卵母細胞，之后通過______（寫出一種具體方法）激活受體細胞使其完成細胞分裂和發育進程。

（3）進行胚胎移植時，胚胎應發育到______階段，移植的方法有______。為一次性獲得多個體，可使用胚胎分割技術，在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意________。

Answer 1

【答案】啟動子、終止子、目的基因 限制性核酸內切酶、DNA連接酶 質粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒 MⅡ 電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑 桑椹胚或囊胚 手術法和非手術法 將內細胞團均等分割

【解析】

（1）基因表達載體的構建（基因工程的核心）目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。組成：目的基因、啟動子、終止子、標記基因、復制原點；啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質；標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來；（2）動物核移植是將動物的一個細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。原理：動物細胞核具有全能性；（3）胚胎移植是指將雌性動物體內的早期胚胎，或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態相同的其它雌性動物的體內，使之繼續發育為新個體的技術。轉基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產的胚胎，都必須經過胚胎移植技術才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。（4）分析題圖可知：轉基因綿羊涉及的技術手段有轉基因技術、核移植、胚胎移植，據此答題。

（1）基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標記基因等；構建基因表達載體常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；常用的載體有質粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（2）動物細胞的核移植到一個去核的MII卵母細胞中；核移植的過程中，用物理或化學方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發育進程。

（3）進行胚胎移植時，胚胎應發育到桑椹胚或囊胚階段，移植的方法有手術法和非手術法。為一次性獲得多個體，可使用胚胎分割技術，在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意將內細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。