Question

【題目】某生物興趣小組想對土壤中能分解尿素的細菌進行分離，并統計每克土壤樣品中的活菌數目，確定了培養基配方(如下表)。將配方中各種物質溶解后，用蒸餾水定容到l 000 mL，再經高溫滅菌，制成固體培養基以備用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
11.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）為保持干燥，培養皿用________________法滅菌；待培養基冷卻到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右時，在酒精燈附近倒平板；待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止____________________________，防止造成污染。

（2）根據培養基的成分判斷，該同學不能分離出土壤中分解尿素的細菌，原因是____________________________________________。

（3）該同學采用稀釋涂布平板法檢測樣液中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是________________________________；然后，將l mL樣液稀釋l00倍，在3個平板上用涂布法分別接入0．1 mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為39、38和37，據此可得出每升樣液中的活菌數為________________。

（4）若該同學采用顯微鏡直接計數法測量細菌數量，左下圖是一塊血細胞計數板正面示意圖，其上有________個計數室。右下圖是計數室中一個中格的細菌分布示意圖，該中格內細菌數量應計為________。

Answer 1

【答案】 干熱滅菌 50 培養皿蓋上的水珠落入培養基 培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，(培養基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素) 檢測培養基平板滅菌是否合格 3.9×107 2 15

【解析】試題分析：根據表格分析，該培養基含有有機碳源、氮源、無機鹽、水，且含有瓊脂，說明是固體培養基。篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養基。分離纖維素分解菌計數時需要用稀釋涂布平板法接種。

（1）微生物培養中的培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，而玻璃器皿可以使用干熱滅菌。倒平板時需要培養基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰旁進行，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養皿蓋上的水珠落入培養基造成污染。

（2）據表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌。

（3）微生物培養的關鍵是無菌，配制的培養基要進行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進行培養以檢測培養基滅菌是否徹底；由題意知1ml水樣中的菌落數是（42+38+37）÷3÷0.1×100=3.9×104個，則每升水樣中的活菌數為3.9×104×103=3.9×107。

（4）據圖分析，左圖血球計數板中有2個計數室；右圖中格的細菌計數原則是內部全部計算，邊框遵循計上不計下，計左不計右的原則，所以該中格中有15個酵母菌。