Question

【題目】根據基因工程的有關知識，回答下列問題：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟： 、 、 、 。

（2）在基因工程的操作過程中需要用到兩種工具酶——限制酶和DNA連接酶。其中限制酶能切割ＤＮＡ分子切割后產生 末端和 末端；DNA連接酶能將目的基因和載體連接起來，按其來源不同可分為兩類，即 和 。

（3）質粒載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如下：

為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是 。

（4）基因工程中常用的載體有質粒、 和 。

Answer 1

【答案】（1）目的基因的獲取 基因表達載體的構建 將目的基因導入受體細胞 目的基因的檢測與鑒定

（2）黏性 平（兩空可調換位置） Ｔ４DNA連接酶 Ｅ．coli DNA連接酶（兩空可調換位置）

（3）切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同（或堿基互補配對）

（4）動植物病毒 λ噬菌體的衍生物（兩空可調換位置）

【解析】

試題分析：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達載體的構建，第三步是將目的基因導入受體細胞，第四步是目的基因的檢測與表達。

（2）在該技術中，切割DNA的工具是限制酶，它能識別某一特定核苷酸序列，使兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．限制酶切割產生的DNA片段末端有兩種形式，分別是黏性末端、平末端；基因工程中常用“分子縫合針”是連接酶，根據酶的來源不同可分為Ecoli連接酶、T4DNA連接酶兩類，其中前者只可以連接黏性末端，后者既可以連接黏性末端，也可以連接平末端。

（3）兩種不同酶切割之后便于相連，所產生的黏性末端必須相同．因此為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同。

（4）基因工程中除質粒外，動植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運載體。