Question

【題目】某目的基因兩側的DNA序列所含的限制性核酸內切酶位點如圖所示，最好應選用下列哪種質粒作為載體（ ）

A. B.

C. D.

Answer 1

【答案】D

【解析】

試題A項中質粒上只有一個限制酶NheⅠ切點，而目的基因的一端有NheⅠ切點，不能把目的基因切下來，故A不合題意；B項中質粒上有一個AluⅠ切點，目的基因兩側也有切點，但是在DNA連接酶的作用下，目的基因不插入時質粒自己也可以連接起來，故這種質粒不是最佳；C項中的質粒有兩個切點，可以避免質粒自身的連接，但是由于NheⅠ的切點在AluⅠ切點的左側，因此用兩種限制酶切割目的基因時，與只用AluⅠ切割效果相同，故C不是最佳方法；D選項中質粒含有兩種限制酶切點SmaⅠ和NheⅠ，同時用來切割質粒可以避免質粒的自身連接，切割目的基因時，兩端有這兩種酶的切點，能保證目的基因插入質粒中后才能連接，故D是最佳質粒。