Question

【題目】2015年11月19日，經過全面的科學論證，美國食品與藥品監督管理局（FDA）批準了世界上第一種食用轉基因動物——AquAdvantage 轉基因大西洋鮭魚，俗稱三文魚（過程如圖①②）。 這種轉基因三文魚生長速度約為普通三文魚的兩倍，可節省75%的飼料成本。如果將抗凍蛋白基因導入番茄可獲得抗凍番茄。

（1）①代表的過程是______________，②過程常以魚的_______為受體細胞。

（2）如圖所示，質粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四種限制酶切割位點，ampr為抗氨芐青霉素基因；抗凍蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三種限制酶切割位點。在進行③基因表達載體的構建過程中，為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發生任意連接，在此實例中，應該選用_______和_______兩種限制酶對質粒和目的基因進行切割。

（3）構建的基因表達載體中除了目的基因外，還必須有______，____終止子、復制原點等。

（4）目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為__________。將基因表達載體導入番茄細胞時，常選擇愈傷組織為受體細胞的原因是_______，將目的基因導入番茄細胞最常采用的方法是________法。檢測轉基因番茄的DNA是否插入了目的基因，常用_______技術。

Answer 1

【答案】目的基因的獲取 受精卵 Pst I Sam I 啟動子 標記基因 轉化 細胞的全能性高 農桿菌轉化法 DNA分子雜交技術

【解析】

本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能準確判斷圖中各過程的名稱，再結合所學的知識準確各選項。

分析題圖：圖示是將抗凍蛋白基因導入番茄可獲得抗凍番茄的過程，其中①表示獲取目的基因的過程，②表示將目的基因導入受體細胞的過程，③表示基因表達載體的構建過程，④表示目的基因的檢測和表達。

（1）①代表目的基因的獲取過程；②表示將目的基因導入受體細胞的過程，該過程常以魚的受精卵為受體細胞。
（2）如圖所示，質粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四種限制酶切割位點，ampr為抗氨芐青霉素基因；抗凍蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三種限制酶切割位點。在進行③基因表達載體的構建過程中，不能用AluⅠ切割，這樣會破壞目的基因；不能用PstI一種酶切割，這樣可能會導致酶切后產生的末端發生任意連接；不能用HindⅢ切割，因為含有目的基因的DNA分子上沒有該酶的切割位點。因此，在此實例中，為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發生任意連接，應該選用PstI和 SamI兩種限制酶對質粒和目的基因進行切割。
（3）基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、標記基因、終止子、復制原點等。
（4）目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為轉化。將基因表達載體導入番茄細胞時，常選擇愈傷組織為受體細胞，原因是細胞的全能性高；將目的基因導入植物細胞最常采用農桿菌轉化法．檢測轉基因番茄的DNA是否插入了目的基因，常用DNA分子雜交技術。